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Séquençage ADN

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Qu'est-ce que le séquençage ADN ?

Le séquençage ADN est le processus qui permet de déterminer la séquence exacte des nucléotides d'ADN (acide désoxyribonucléique).  L'objectif du séquençage est d'établir l'ordre dans lequel quatre blocs chimiques, ou bases – adénine, guanine, cytosine et thymine – s'enchaînent dans la molécule d'ADN. Les premières méthodes de séquençage d'ADN ont été mises au point au milieu des années 1970 par Fred Sanger, mais aussi par Walter Gilbert et Allan Maxam. Le premier fragment d'ADN séquencé appartenait à un virus, le bactériophage T4, qui infecte spécifiquement la bactérie Escherichia coli. Depuis la finalisation du projet Génome humain, plusieurs méthodes ont été élaborées pour effectuer du séquençage à grande échelle. Les améliorations technologiques et l'automatisation ont atteint un tel niveau que les laboratoires peuvent aujourd'hui séquencer plus de 100 000 milliards de bases par an. Le séquençage à grande échelle repose aujourd'hui sur plusieurs méthodes, capables de cibler de grands nombres de fragments ADN courts, voire des chromosomes entiers.

Méthodes de séquençage de l'ADN

On distingue deux grands types de séquençage ADN :

Méthodes de séquençage de l'ADN

  • La méthode de Sanger, également appelée didéoxy, est la méthode classique, basée sur des terminateurs de chaîne. Elle est encore utilisée pour déterminer les séquences de chaînes d'ADN relativement longues, avec de faibles volumes. Toutefois, s'il faut séquencer un grand nombre de molécules dans des délais courts, le coût élevé et le caractère fastidieux de cette méthode découragent son emploi.
  • Le séquençage haut débit (méthode HTS), également appelé technique de séquençage nouvelle génération (NGS). La NGS se caractérise par sa précision et sa vitesse ; elle est également moins coûteuse et nécessite moins de main-d'œuvre.

La mise en œuvre de la méthode de séquençage haut débit a élargi les applications de la génomique. Le séquençage ADN fait aujourd'hui partie intégrante des sciences, de la recherche translationnelle, du diagnostic médical et de l'analyse médico-légale.

Ressources complémentaires

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